高效解离与活性维持的双重突破：Accutase细胞消化液助力类器官研究！
Accutase是一种含有蛋白水解酶和胶原溶解酶的细胞分离溶液，不含任何动物或细菌来源的成分，是胰蛋白酶-EDTA消化液的完美替代品！温和有效地消化绝大多数贴壁细胞，保留细胞表面的大多数抗原表位，不需要血清终止消化，可满足后续的流式实验需求。
Hela细胞Accutase消化后图片
遵研的Accutase细胞消化液（ZYFA001-0100）不仅在普通细胞及难消化、脆弱细胞的消化中展现卓越性能，更创新应用于类器官培养领域，助力客户实现高效解离与活性维持的双重突破，为三维组织模型构建提供全新解决方案。
标题
VGLL4 promotes vascular endothelium specification via TEAD1 in the vascular organoids and human pluripotent stem cells-derived endothelium model
期刊
Cellular and Molecular Life Sciences
IF
6.2
单位
南京医科大学杨杨课题组
1) Hippo-YAP信号通路：该通路在心血管发育和再生中起关键作用，核心组件包括激酶（NF2、MST1/2、LATS1/2）、共转录因子（YAP/TAZ、VGLL4）及转录因子（TEAD1-4）。
2) VGLL4的功能：VGLL4是Hippo通路中的共转录因子，通过其Tondu结构域与TEAD结合，参与细胞命运决定，但具体机制在血管内皮细胞分化中尚不明确。
3) 研究目的：探讨VGLL4在3D血管类器官（VOs）和hPSC衍生的内皮细胞模型中的作用机制。
1) 细胞培养与分化：
a. 使用Nuwacell培养基培养hESCs，通过特定生长因子（如CHIR99021、BMP4、VEGF-A）诱导生成血管类器官。
b. 两步法分化内皮细胞：中胚层诱导（CP21R7+BMP4）→ 内皮细胞诱导（VEGF-A+forskolin）。
2) 基因工程：
PiggyBac系统生成VGLL4过表达细胞系，CRISPR/Cas9生成VGLL4杂合敲除细胞系。
3) 分子生物学分析：
qRT-PCR、免疫印迹、免疫荧光、流式细胞术、管形成实验及DiI-Ac-LDL摄取实验。
(4)蛋白质相互作用：免疫共沉淀验证VGLL4与TEAD1的结合。
1) VGLL4表达与功能：
a. VGLL4在VOs生成中表达上调，敲除导致VOs体积减小、血管连接点减少，内皮标记物（CD31、PDGFR-β）表达下降。
b. 过表达VGLL4促进VOs生成，增加CD31+/VE-CAD+细胞比例。
2) 分子机制：
a. VGLL4与TEAD1物理结合，共同促进内皮关键转录因子（如FLI1）的表达。
b. TEAD1过表达可部分挽救VGLL4敲除导致的分化缺陷。
VGLL4的核心作用：VGLL4通过与TEAD1结合，增强内皮细胞关键转录因子的表达，从而在血管类器官生成和hPSC内皮细胞分化中发挥关键作用，为心血管再生治疗提供新靶点。
标题
Polyoxyethylene tallow amine and glyphosate exert different developmental toxicities on human pluripotent stem cells-derived heart organoid model
期刊
Sci Total Environ.
IF
8
单位
南京医科大学杨杨课题组
草甘膦除草剂（GBHs）的心脏发育毒性存疑，其助剂POEA（聚氧乙烯牛脂胺）的作用未知；传统动物模型存在物种差异局限。
利用人心脏类器官（hHOs）模型，评估POEA、草甘膦（Gly）单暴露及联合暴露的毒性：
1）暴露剂量：POEA（0.033–3.333 µg/mL）、Gly（0.1–10 µg/mL），模拟环境浓度。
2）评估指标：类器官收缩功能、细胞组成（心肌/内皮/心外膜）、转录组测序。
1）POEA单暴露：抑制心脏收缩，破坏心肌细胞亚型分化（MYL2+/MYL7+↓），扰乱代谢通路（脂肪酸代谢异常）。
2）联合暴露：表型与POEA单暴露相似，POEA主导毒性。
3）Gly单暴露：仅引起轻度心外膜增生（WT1+区域↑），不影响心脏收缩。
POEA是GBHs心脏发育毒性的主要风险成分，其通过干扰关键信号通路与代谢过程损害心脏分化；Gly仅在高剂量下引发生理性异常。hHOs模型为环境毒素的心脏发育风险评估提供了高效、人源化平台。
POEA：抑制WNT/BMP信号通路，下调心肌发育基因（HAND1, TBX20）。
Gly：激活BMP/NOTCH通路，促进心外膜增生。
POEA人体暴露数据缺乏，剂量设定依赖GBHs配方比例；hHOs模型需结合动物实验进一步验证。
（ 遵研Accutase细胞消化液 ）✦
ZYFA001-100（100 mL）
产品特点
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不需要中和
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可用于流式细胞术分析
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温和分离，最大限度地提高细胞活力
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轻松分离大多数细胞类型，包括胚胎干细胞和神经元干细胞
经过验证的细胞类型
人胚胎干细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、血管内皮细胞、肝细胞、血管平滑肌细胞、肝祖细胞、原代鸡胚胎神经元细胞、骨髓干细胞、贴壁CHO和BHK细胞、巨噬细胞，293细胞、L929细胞、永生化小鼠睾丸生殖细胞、3T3、Vero、Cos、HeLa、NT2、MG63、M24和A375转移性黑素瘤、胶质瘤U251和D54、HT1080纤维肉瘤细胞和Sf9昆虫细胞等。
经过验证的实验类型
人胚胎干细胞培养、细胞表面标志物分析、病毒生长测定、血清饥饿静止测定、癌基因转染转化测定、神经嵴细胞迁移测定、细胞增殖、细胞凋亡、肿瘤细胞迁移测定、常规细胞传代、大规模生产(生物反应器)和流式细胞术等。
▲用Accutase处理在DMEM+10%FBS中培养的人MG63骨肉瘤细胞。结果显示，Accutase能快速地消化细胞为单细胞悬液，并保持最大细胞存活率。Accutase对细胞温和；即使在Accutase中45分钟后，细胞存活率仍为97±3%。
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在细胞凋亡实验中，贴壁细胞消化需用不含EDTA的胰酶（Annexin V和PS的结合需要Ca2+，而EDTA是Ca2+螯合剂，使用含有EDTA的胰酶会造成假阴性）；其次消化时间不宜过长，吹打细胞要轻柔，胰酶的过度消化和机械损伤都会引起细胞膜的损伤，造成假阳性。我们的Accutase细胞消化液是胰蛋白酶-EDTA消化液的完美替代品，而且可以温和有效地消化绝大多数贴壁细胞，是凋亡检测的得力帮手哦~
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赛尔普生物类器官联合研究中心
赛尔普携手捷方凯瑞创办类器官联合研究中心，深耕类器官技术研发与应用多年，致力于为生命科学领域提供前沿创新解决方案。我们不仅拥有行业领先的类器官培养技术体系，更通过常态化举办的专项培训班，系统传授从基础构建到高级应用的全流程实操经验。
依托捷方凯瑞自主研发的高效试剂与标准化产品，赛尔普和捷方凯瑞已成功助力多领域科研团队实现类器官模型的高保真构建与功能化研究。无论您是希望提升技术能力，还是寻求定制化解决方案，赛尔普都将以专业团队与成熟资源，为您提供从技术培训到产品支持的一站式服务。立即咨询，共探类器官研究新维度！
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